Tesis de doctorado

María Zulema Juárez Cortés

Cesar Salvador Cardona Felix y Sergio Francisco Martínez Díaz

Doctorado en Ciencias Marinas

2024

Evaluación de la Thurincina H recombinante como agente antibacteriano del patógeno acuícola Streptococcus iniae

En acuicultura, una de las problemáticas es el control de bacterias patógenas emergentes, por lo que la búsqueda de nuevos compuestos antimicrobianos es una prioridad. En este contexto, evaluamos la actividad antibacteriana in vitro e in vivo de la bacteriocina Thurincina H (ThurH), producida de forma recombinante en Bacillus thuringiensis genotipo Cry-B-pThur y purificada por tamizaje de peso molecular. Para ello, se seleccionó como blanco a la bacteria patógena Streptoccocus iniae del cepario del CICIMAR-IPN. Se evaluó la estabilidad de ThurH en agua de mar. La susceptibilidad in vitro de la cepa blanco tratada con ThurH, se determinó a través del efecto en su cinética de crecimiento, tratada con distintas concentraciones de ThurH purificada para determinar la Concentración Mínima Inhibitoria (MIC). La actividad bactericida se evaluó a 16 MIC de concentración y con 2x105 UFC iniciales. Se realizaron pruebas de toxicidad in vivo en Artemia franciscana, exponiéndola a diferentes concentraciones de ThurH y se determinó el porcentaje de supervivencia a 24 h. Se evaluó el efecto de la aplicación de la ThurH durante una prueba reto, en un modelo estandarizado de infección de Artemia franciscana con S. iniae, determinando la supervivencia a 48 h y finalmente se realizó un análisis histológico para corroborar el efecto de la ThurH. Los resultados muestran que ThurH es activa en agua de mar y que, inhibe el crecimiento de S. iniae al 100% a una concentración de 70 µg/mL, mientras que la MIC se determinó a 35 µg/mL. La actividad bactericida se observó en los primeros 10 min y la reducción de células viables fue del 100%. ThurH no es tóxica a 1000 µg/mL. Las pruebas reto y el análisis histológico, demostraron que ThurH si puede ser estudiada en ensayos in vivo y que su efecto mejora cuando se aplica el doble de la dosis mínima inhibitoria (MIC) calculada en condiciones in vitro. Estos resultados sugieren que, ThurH posee el potencial de ser una alternativa antimicrobiana para especies en cultivo marinos.

Bacteriocina, Artemia franciscana, actividad antimicrobiana

97 h.

Disponible solo en versión digital

QR1484 J83 2024

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