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Resumen del producto

Muñoz Ochoa, M., V.A., Villegas Silva, D.L., Arvizu Higuera & G., Hernández Carmona (2013). Caracterización parcial y actividad anticoagulante de polisacáridos obtenidos a partir del alga café Sargassum lapazeanum. 9a. Reunión Internacional de Investigación en Productos Naturales. Pachuca de Soto, Hidalgo, México, México, mayo 29 - 31, 2013, 164.

Caracterización parcial y actividad anticoagulante de polisacáridos obtenidos a partir del alga café Sargassum lapazeanum

Mauricio Muñoz Ochoa, Valeria Alexandra Villegas Silva, Dora Luz Arvizu Higuera y Gustavo Hernández Carmona

Como parte de la búsqueda de nuevos compuestos activos a partir de organismos marinos, fue seleccionada el alga café Sargassum lapazeanum para extraer y caracterizar la fracción hidrosoluble constituida principalmente por polisacáridos. El alga fue recolectada en la zona intermareal de San Juan de la Costa (La Paz, B.C.S), fue secada al sol, molida y posteriormente sus componentes fueron extraídos con agua destilada a 55 °C y agitación continua por 2 hrs (3 veces). La mezcla fue separada por filtración y la solución fue clarificada por centrifugación. El sobrenadante fue precipitado primeramente con CaCl2 al 10% para separar el alginato de sodio, posteriormente se precipitó con 3 volúmenes de etanol. El sólido obtenido o extracto crudo, fue recuperado por centrifugación, re disuelto en agua y sometido a un proceso de precipitación fraccionada, adicionando uno a uno, 3 volúmenes de etanol. El sólido precipitado entre cada adición fue recuperado por centrifugación, obteniéndose 3 fracciones (F1, F2, F3). Cada fracción fue evaluada en su actividad anticoagulante a una concentración de 100 µg/mL. El extracto crudo mostró valores de Tiempo de Protrombina (TP) = 33 segundos (s) y Tiempo de Tromboplastina Parcial activada (TTPa)= >300 s. Las fracciones F1, F2 y F3 mostraron un TP de 25, 41 y 24 s respectivamente (TP control= 14 s). En el ensayo de TTPa los valores sobrepasaron 10 veces al tiempo normal de coagulación (TTPa control = 30 s). Se realizaron curvas de dosis-efecto para determinar la concentración mínima para duplicar el tiempo normal de coagulación en el ensayo de TTPa, tanto el extracto crudo como las fracciones duplicaron el TTPa a baja concentración (3.12 µg/mL), las fracciones F1 y F3 duplicaron el TP control a 100 µg/mL y la fracción F2 lo triplicó a esta misma concentración. Los resultados sugieren que el ensayo de TTPa es más sensible a los polisacáridos de S. lapazeanum. Se ha reportado que los fucanos modulan la coagulación sanguínea a través de la vía intrínseca3 la cual es evaluada por el TTPa, esto explica porque en el ensayo de TP ninguna de las fracciones mostró una actividad significativa. La estructura parcial del extracto crudo y de las fracciones obtenidas, fueron analizadas por espectroscopia de infrarrojo (FTIR). La fracción precipitada con CaCl2 mostró bandas típicas de poliuronatos a 948, 898 y 811 cm-1, correspondientes a alginato de sodio1. La fracciones F1, F2 y F3 mostraron bandas de absorción 1620, 1417, 1370, 1250, 1040, 840 cm-1 que corresponden con un heterofucano compuesto principalmente de fucosa sulfatada (enlaces ?,1?3, grupo sulfato en posición axial al carbón 2, 4)2, ácidos urónicos (1620, 950, 898 cm-1)1 y otros azúcares en menores proporciones. Las bandas de absorción a 3350 cm-1 y 1620 cm-1 corresponden a los grupos hidroxilo y carboxilo, respectivamente. No se observaron bandas de absorción alrededor de 1720 cm-1, lo que sugiere la ausencia de grupos O-acetilo4. Las diferencias de intensidad de las bandas de los respectivos espectros sugieren la misma composición química para las fracciones F1, F2 y F3, pero en diferentes concentraciones. Los resultados sugieren que S. lapazeanum tiene potencial como fuente de polisacáridos sulfatados con capacidad moduladora de la coagulación sanguínea.

Palabras clave: anticoagulante; Sargassum lapazeanum; polisacáridos sulfatados

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